水平电泳中常见问题及解决方法汇总
| 问题1：泳道（或条带）倾斜 | |
| 凝胶没有充分凝固 | 至少放置30-45 分钟使胶凝固 |
| 梳子弯曲或倾斜 | 检查梳子的摆放 |
| 问题2：泳道（或条带）呈曲线或扭曲 | |
| 样品孔中有气泡 | 电泳前去除气泡 |
| 问题3：相对迁移率有差异 | |
| 样品从样品孔溢出 | 样品需合适的浓度并小心上样 |
| 电泳装置不水平 | 在稳固的桌面上调节水平 |
| 问题4：条带弯曲，微笑 | |
| 样品过载 | 减少上样量 |
| 问题5：条带粗糙 | |
| 样品密度不正确 | 见样品应用指南 |
| 样品孔不成型 | 拔掉梳子时需小心，尤其是对较软的胶。让凝胶充分冷却有助于梳子的拔除。 |
| 电压过高或过热 | 降低电压。 |
| 问题6：条带拖尾或产生条纹 | |
| 琼脂糖具有不适合的内渗透作用（Mr） | 请咨询琼脂糖供应商 |
| 样品中的盐分太高 | 减少盐浓度到≧0.1M |
| 电压和产热太高 | 降低电压。 |
| 样品溢出到样品孔外 | 小心加样或增加凝胶厚度以增大 样品孔，或调整梳子高度 |
| 不完全消化，核酸酶被污染或劣质酶 | 加热样品，检查酶活性，进一步消化样品 |
| 样品孔穿透凝胶，样品在凝胶底部漏出 | 梳子必须比凝胶底部表面高出1-2 mm |
| 样品过多 | 稀释样品 |
| 问题7：条带窄但数量过少 | |
| 琼脂糖凝胶浓度太高 | 降低琼脂糖浓度 |
| 不完全消化 | 检查酶活性，进一步消化样品 |
| 问题8：高分子量条带窄，低分子量条带弥散 | |
| 琼脂糖凝胶浓度太低 | 提高琼脂糖浓度，或者改为聚丙烯酰胺电泳 |
| 问题9：凝胶破裂 | |
| 电压梯度太高，特别对于低熔点琼脂糖或低张力凝胶 | 降低电压，在较低的温度下运行电泳 |
2024年6月28日 14:02
ꄘ浏览量：0
